Novas ferramentas para a monitorização do vírus da PRRS: quando e quais utilizar?

Em muitos países, há um número crescente de explorações de reprodução endemicamente infectadas com variantes de campo emergentes do vírus da PRRS. Nas fases iniciais dos surtos de PRRSV, a produção é afectada desde os animais de reprodução até aos animais de engorda. No entanto, à medida que se estabelece a imunidade do efectivo, a infecção passa de mínima a subclínica no efectivo reprodutor. Os sinais clínicos nesta fase são mais evidentes nas explorações de suínos em crescimento, especialmente no final da transição, quando a imunidade materna diminui.

A monitorização atenta da infecção por vPRRS é crucial para garantir que a população recupera total e atempadamente da infecção e dos sinais clínicos. Em resposta a esta necessidade, registaram-se muitos avanços nos sistemas de monitorização e vigilância, incluindo abordagens clínicas e de diagnóstico.

Acompanhamento diagnóstico

Segundo os dados do SDRS (Swine Disease Reporting System), na última década deu-se uma mudança fundamental, passando da utilização de amostras de soro para amostras agregadas da população para o ensaio do ARN vPRRS. Os fluidos orais são o principal tipo de amostra utilizado nos suínos de engorda para detectar a actividade viral. Nas explorações de criação, os fluidos de processamento (PF) são a amostra mais utilizada, seguidos dos fluidos orais e dos tecidos.

Os fluidos de processamento (PF) são uma amostra prática para detectar a actividade do vPRRS em explorações de reprodução que realizam a castração física dos leitões. São colhidas amostras de leitões com 2-7 dias de idade e muitas explorações enviam amostras combinadas de leitões processados durante a semana. É habitual recolher PF de tantas ninhadas e salas quanto possível, mantendo as amostras refrigeradas ou congeladas na exploração e enviando amostras agrupadas por dia para testes PCR agrupados para representar essa semana específica. Quando os resultados começarem a ser negativos na PCR, os veterinários podem abrir os grupos e testar cada dia separadamente para aumentar a sensibilidade.

Quando os PF começam a apresentar consistentemente resultados negativos na PCR (ou seja, 4-6 semanas consecutivas), a questão principal é saber se a população de desmame permanece negativa. Nessa situação, se o vírus ainda estiver a circular na exploração, é provável que a prevalência seja muito baixa (≤ 3% de prevalência). Por conseguinte, é necessário um protocolo de monitorização altamente sensível. É aqui que entram em ação os fluidos orais familiares (FOF). Os FOF consistem em pendurar uma corda onde tanto a porca como a respectiva ninhada têm acesso, deixando amostras de fluidos orais que representam "a família". Foram descritas calculadoras do tamanho da amostra como guia para estabelecer o número de amostras de FOF e a intensidade de agrupamento dessas amostras, consoante a dimensão da sala de parto e o nível de confiança pretendido.

Outra abordagem recente é a utilização de fluidos da língua de leitões mortos. Este método baseia-se na recolha de amostras de animais mortos, que têm mais probabilidades de conter o vírus, e é muito eficaz em comparação com os métodos que utilizam amostras de animais vivos. É útil quando se verifica uma descida inesperada dos valores Ct das PCR de amostras de PF, soro ou FOF. Além disso, quando se regista uma duração atipicamente longa de resultados PCR positivos (ou seja, 40 ou mais semanas após o surto de PRRS). A amostragem da língua de leitões nados-mortos permite saber se a infecção tem origem nas mães (ou seja, transmissão vertical) ou se a infecção ocorre na maternidade (ou seja, transmissão horizontal). A Dra. Isadora Machado et al. referiram recentemente que a probabilidade de detecção do ARN vPRRS na língua de leitões nados-mortos era semelhante ou superior à dos fluidos processuais, do soro e dos fluidos orais familiares.

Por outro lado, o Dr. "Jack" Li Peng relatou recentemente uma amostra promissora chamada raspagem das amígdalas orais (TOSc). Resumidamente, a TOSc envolve a utilização de uma cânula de inseminação para recolher uma amostra da zona das amígdalas da porca, recolhendo uma amostra viscosa. Os seus dados preliminares, que comparam os resultados da PCR sérica, da raspagem das amígdalas e da TOSc com 30 porcas, revelaram uma maior positividade na TOSc em comparação com outros tipos de amostras. Os estudos estão em curso no momento da redacção do presente relatório e os resultados deverão estar disponíveis em breve. Outra vantagem da amostragem TOSc é o facto de não exigir que as porcas sejam amarradas, o que torna o processo de amostragem relativamente rápido em comparação com o método convencional de raspagem das amígdalas.

Tabela 1: Técnicas de amostragem baseadas na população.

Monitorização clínica

A monitorização diagnóstica é muito precisa, com excelente especificidade e sensibilidade. No entanto, geralmente não é realizada diariamente na maioria das explorações. Para resolver este problema e manter o efectivo reprodutor sob vigilância 24 horas por dia, os produtores estão a tirar partido da monitorização clínica utilizando fluxos de dados disponíveis na nuvem. Os algoritmos baseados no controlo estatístico de processos (SPC) estão disponíveis para estabelecer uma monitorização automatizada contínua de parâmetros seleccionados utilizando dados de base específicos da exploração. Exemplos são o número de abortos, o número de porcas que não comeram durante a gestação e as perdas neonatais (nados-mortos e fetos mumificados). Quando se verifica um aumento significativo de um ou mais destes parâmetros, são emitidos alertas para os produtores previamente registados, que podem realizar testes de diagnóstico específicos para determinar a causa desta variação.

Considerações finais

Programas como o SDRS fornecem uma grande quantidade de informações a nível macro-epidemiológico. Essas informações são dinâmicas e evoluem rapidamente no tempo e no espaço. A colheita de amostras em populações de suínos, incluindo fluidos orais, fluidos de processamento e pontas de língua, permite a caraterização prática da actividade do vPRRS ao nível do pavilhão (ou do parque). As amostras TOSc, se validadas, representam um passo significativo no sentido de permitir o rastreio da vPRRS em porcas gestantes. Cada abordagem de amostragem serve para abordar uma questão específica. Por exemplo:

• os fluidos de processamento são excelentes para detectar a actividade viral em toda a exploração
• os fluidos orais familiares destinam-se a verificar a actividade da vPRRS em leitões em idade de desmame.
• as pontas de língua de leitões nascidos mortos servem para avaliar a transmissão vertical.

Para além das ferramentas de monitorização diagnóstica, os produtores devem tirar partido dos dados clínicos disponíveis para manter a exploração monitorizada 24 horas por dia, 7 dias por semana, de forma a detectar precocemente surtos de doença, permitindo uma resposta rápida e ajustar as medidas de biocontenção conforme necessário para evitar uma maior propagação do agente patogénico a outras populações de suínos que tenham ligações epidemiológicas com a população. Em conjunto, estes métodos de amostragem fornecem aos produtores e aos respectivos veterinários várias ferramentas para compreender a situação da vPRRS em cada população.